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關(guān)于mirRNA反轉(zhuǎn)錄的技術(shù)問題?

我現(xiàn)在正在嘗試通過Q-RT PCR的方法檢測(cè)mir433的表達(dá),用試劑盒提取的mirRNA濃度普遍在100ng/ul左右。反轉(zhuǎn)錄的方案是在mirRNA上加10個(gè)左右的A,之后用3`oligoT的引物反轉(zhuǎn)錄。用的Takara的polyA聚合酶(2181),這個(gè)酶的體系怎么配,說明書上沒有說明。請(qǐng)大神指導(dǎo),此外,有其他成功的反轉(zhuǎn)錄方案,但說無妨,萬分感謝!

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