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微生物分離篩選
(Microbial Isolation and Screening)
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技術待認領

技術概述

微生物種類繁多,總數(shù)龐大,針對不同的微生物對能量、營養(yǎng)和理化條件的需求不同(包括各因子的種類和濃度不同),對現(xiàn)有培養(yǎng)基經(jīng)過適當?shù)膬?yōu)化改造可以用于新的微生物的分離培養(yǎng)。

傳統(tǒng)經(jīng)典分離篩選方法:
微生物平板培養(yǎng)方法:微生物平板培養(yǎng)方法是一種傳統(tǒng)的實驗方法。這種方法主要使用不同營養(yǎng)成分的固體培養(yǎng)基對土壤中可培養(yǎng)的微生物進行分離培養(yǎng),然后根據(jù)微生物的菌落形態(tài)及其菌落數(shù)來計測微生物的數(shù)量及其類型。

新型分離篩選方法:
1. 稀釋培養(yǎng)法:
1.1 擴散盒培養(yǎng)法
Kaeberlei等在分離培養(yǎng)潮間帶底泥中的微生物時使用一種新穎的自制培養(yǎng)儀器,為其起名為擴散盒。擴散盒由一個環(huán)狀的不銹鋼墊圈和兩側(cè)膠連的0.11μm濾膜組成,濾膜只能允許培養(yǎng)環(huán)境中的化學物質(zhì)通過而不能讓細胞通過。

1.2細胞包囊法
Zengler等將海水和土壤樣品中的微生物先進行類似稀釋培養(yǎng)法的稀釋過程,然后乳化,部分微生物形成了僅含單個細胞的膠狀微滴。然后將膠狀微滴裝入層析柱內(nèi),使培養(yǎng)液連續(xù)通過層析柱進行流態(tài)培養(yǎng)。層析柱進口端用0.11μm濾膜封住,防止細菌的進入而污染層析柱;出口端用8μm濾膜封住,允許培養(yǎng)產(chǎn)生的細胞隨培養(yǎng)液流出。該方法的特點是讓微生物在開放式培養(yǎng)液中生長,使培養(yǎng)環(huán)境接近于微生物的自然生長環(huán)境,能夠很好地提高微生物可培養(yǎng)性,但成本較高,不利于普及使用。

2. 序列引導分離法
序列引導分離技術是根據(jù)微生物基因組中特定基因的特異性序列,設計引物或雜交探針,以培養(yǎng)物中目標序列存在和變化情況為標準,來指導對微生物最優(yōu)培養(yǎng)條件的選擇,培養(yǎng)出新的微生物。

(資料來源:百度百科、聚生物編輯)

技術詳情

(XXX編輯,XXX修善)

參考文獻

1.Pham VH,Kim J.Cultivation of unculturable soil bacteria.Trends in Biotechnology, 2012, 30(9):475-484.
2.王保軍,劉雙江.環(huán)境微生物培養(yǎng)新技術的研究進展.微生物學通報, 2013, 40(1) : 6-17.
3.郭斌,吳曉磊,錢易.提高微生物可培養(yǎng)性的方法和措施.微生物學報, 2006, 46(3):508-511.
4. Buerger S,Spoering A,Gavrish E,et al.Microbial scout hypothesis and microbial discovery. Applied and Environmental Microbiology,2012,78(9):3229-3233.

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