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TALEN基因編輯
(Transcription activator like effector engineering technology)
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技術(shù)待認(rèn)領(lǐng)

技術(shù)概述

轉(zhuǎn)錄激活因子樣效應(yīng)物核酸酶(TALEN)是二聚的轉(zhuǎn)錄因子/核酸酶,由33至35個(gè)氨基酸模塊構(gòu)成,其中每個(gè)靶定單個(gè)核苷酸。通過組裝這些模塊,研究人員可靶定他們想要的任何序列,是靶向基因編輯的常用工具之一。
TALE構(gòu)建技術(shù)(Transcription activator like effector engineering technology)是基于植物病原體黃單胞菌( Xanthomonas) 分泌的一種轉(zhuǎn)錄激活子樣效應(yīng)因子( transcription activator–like effector,TALE) 可以識(shí)別DNA序列的原理而設(shè)計(jì)和構(gòu)建靶向特異基因的TALE蛋白的技術(shù)。TALE 蛋白是由N 端分泌信號(hào)、中央DNA結(jié)合域、核定位信號(hào)和C端激活域構(gòu)成。TALE蛋白的DNA結(jié)合域是由可以識(shí)別單個(gè)核苷酸堿基的氨基酸序列模塊串聯(lián)而成的,氨基酸序列與其靶位點(diǎn)的核酸序列有恒定的對(duì)應(yīng)關(guān)系。利用TALE的序列模塊,可組裝成特異結(jié)合任意DNA序列的模塊化組合蛋白,從而達(dá)到識(shí)別內(nèi)源性基因的目的。
TALEN 技術(shù)是將TALE 蛋白中的DNA結(jié)合域與FokI 核酸內(nèi)切酶的切割域融合,設(shè)計(jì)和構(gòu)建能在特定基因位點(diǎn)產(chǎn)生雙鏈斷裂的的技術(shù)。雙鏈斷裂可以極大的提高斷裂位點(diǎn)周圍的基因修復(fù)活性,利用易錯(cuò)修復(fù)(非同源末端聯(lián)結(jié))或者同源重組修復(fù)的方式實(shí)現(xiàn)特異位點(diǎn)DNA的改造,例如定點(diǎn)基因敲除 (Knock-out) 、基因敲入 (Knock-in) 或點(diǎn)突變修飾等等。研究結(jié)果顯示,人工構(gòu)建的TALENs能夠?qū)?dòng)植物細(xì)胞的基因組進(jìn)行高度特異的和高效的修飾。TALENs的活性和DNA序列識(shí)別的特異性在酵母、植物和哺乳動(dòng)物包括人類等多種細(xì)胞中已經(jīng)相繼得到驗(yàn)證。

( 資料來源:金維智生物、王昕 1)

技術(shù)詳情

(XXX編輯,XXX修善)

參考文獻(xiàn)

[1] 王昕, 張志強(qiáng), 張智英. TALE核酸酶介導(dǎo)的基因組定點(diǎn)修飾技術(shù)[J]. 中國(guó)生物化學(xué)與分子生物學(xué)報(bào), 2012, 28(3):211-216.

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