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蛋白質(zhì)是生命有機(jī)體的主要成分,在生命體生長發(fā)育的各個(gè)階段都起著重要作用。所以分離和檢測蛋白質(zhì)一直是人們研究的熱點(diǎn)。目前,HPLC技術(shù)廣泛地應(yīng)用于蛋白質(zhì)的分離和檢測。近來,隨著色譜泵的改進(jìn)(可產(chǎn)生105MPa的壓力)出現(xiàn)了特高效液相色譜(VHPLC),使蛋白質(zhì)的分離更快速高效。目前,HPLC技術(shù)日趨成熟,它已成為分離和檢測蛋白質(zhì)的重要工具。

分離蛋白質(zhì)的HPLC模式

蛋白質(zhì)在物理、化學(xué)及功能等特征上的差異為蛋白質(zhì)的分離檢測提供了基礎(chǔ)。根據(jù)蛋白質(zhì)的大小、形狀、電荷、疏水性、功能等特性以及蛋白質(zhì)的來源、實(shí)驗(yàn)要求等可以選擇不同的模式來分離目標(biāo)蛋白質(zhì)。

用于蛋白質(zhì)分離檢測的HPLC檢測器(HPLCD)

在HPLC分析蛋白質(zhì)中,HPLCD的優(yōu)劣對于檢測效果有著至關(guān)重要的作用。近年來,HPLCD技術(shù)發(fā)展很快,其檢測蛋白質(zhì)的靈敏度以及其它性能都得到了很大的提高。

蛋白質(zhì)分離檢測的HPLC聯(lián)用技術(shù)

為了使蛋白質(zhì)的檢測更加準(zhǔn)確方便,人們研究了各種HPLC聯(lián)用技術(shù)。目前常用的比較成功的聯(lián)用技術(shù)主要有:高效液相色譜—質(zhì)譜(HPLC-MS)、高效液相色譜—毛細(xì)管電泳(HPLC-CE)、高效液相色譜—等速電泳(HPLC-ITP)、高效液相色譜—電感耦合等離子體原子發(fā)射光譜(HPLC-ICP-AES)。