微生物分離篩選
(Microbial Isolation and Screening)
技術(shù)概述
微生物種類繁多,總數(shù)龐大,針對(duì)不同的微生物對(duì)能量、營(yíng)養(yǎng)和理化條件的需求不同(包括各因子的種類和濃度不同),對(duì)現(xiàn)有培養(yǎng)基經(jīng)過(guò)適當(dāng)?shù)膬?yōu)化改造可以用于新的微生物的分離培養(yǎng)。
傳統(tǒng)經(jīng)典分離篩選方法:
微生物平板培養(yǎng)方法:微生物平板培養(yǎng)方法是一種傳統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)方法。這種方法主要使用不同營(yíng)養(yǎng)成分的固體培養(yǎng)基對(duì)土壤中可培養(yǎng)的微生物進(jìn)行分離培養(yǎng),然后根據(jù)微生物的菌落形態(tài)及其菌落數(shù)來(lái)計(jì)測(cè)微生物的數(shù)量及其類型。
新型分離篩選方法:
1. 稀釋培養(yǎng)法:
1.1 擴(kuò)散盒培養(yǎng)法
Kaeberlei等在分離培養(yǎng)潮間帶底泥中的微生物時(shí)使用一種新穎的自制培養(yǎng)儀器,為其起名為擴(kuò)散盒。擴(kuò)散盒由一個(gè)環(huán)狀的不銹鋼墊圈和兩側(cè)膠連的0.11μm濾膜組成,濾膜只能允許培養(yǎng)環(huán)境中的化學(xué)物質(zhì)通過(guò)而不能讓細(xì)胞通過(guò)。
1.2細(xì)胞包囊法
Zengler等將海水和土壤樣品中的微生物先進(jìn)行類似稀釋培養(yǎng)法的稀釋過(guò)程,然后乳化,部分微生物形成了僅含單個(gè)細(xì)胞的膠狀微滴。然后將膠狀微滴裝入層析柱內(nèi),使培養(yǎng)液連續(xù)通過(guò)層析柱進(jìn)行流態(tài)培養(yǎng)。層析柱進(jìn)口端用0.11μm濾膜封住,防止細(xì)菌的進(jìn)入而污染層析柱;出口端用8μm濾膜封住,允許培養(yǎng)產(chǎn)生的細(xì)胞隨培養(yǎng)液流出。該方法的特點(diǎn)是讓微生物在開放式培養(yǎng)液中生長(zhǎng),使培養(yǎng)環(huán)境接近于微生物的自然生長(zhǎng)環(huán)境,能夠很好地提高微生物可培養(yǎng)性,但成本較高,不利于普及使用。
2. 序列引導(dǎo)分離法
序列引導(dǎo)分離技術(shù)是根據(jù)微生物基因組中特定基因的特異性序列,設(shè)計(jì)引物或雜交探針,以培養(yǎng)物中目標(biāo)序列存在和變化情況為標(biāo)準(zhǔn),來(lái)指導(dǎo)對(duì)微生物最優(yōu)培養(yǎng)條件的選擇,培養(yǎng)出新的微生物。
技術(shù)詳情
參考文獻(xiàn)
1.Pham VH,Kim J.Cultivation of unculturable soil bacteria.Trends in Biotechnology, 2012, 30(9):475-484.
2.王保軍,劉雙江.環(huán)境微生物培養(yǎng)新技術(shù)的研究進(jìn)展.微生物學(xué)通報(bào), 2013, 40(1) : 6-17.
3.郭斌,吳曉磊,錢易.提高微生物可培養(yǎng)性的方法和措施.微生物學(xué)報(bào), 2006, 46(3):508-511.
4. Buerger S,Spoering A,Gavrish E,et al.Microbial scout hypothesis and microbial discovery. Applied and Environmental Microbiology,2012,78(9):3229-3233.
聚生物技術(shù)詞條修善計(jì)劃
對(duì)現(xiàn)在的詞條不滿意?或者您有關(guān)于該技術(shù)的獨(dú)特見解,最新發(fā)展資訊?都可以投稿給聚生物。一經(jīng)采用,您對(duì)該詞條的貢獻(xiàn)將被聚生物所有用戶所看到。
投稿參加技術(shù)詞條修善計(jì)劃