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定量蛋白組分析
(Quantitative Proteomics)
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技術待認領

技術概述

細胞內(nèi)蛋白質(zhì)組豐度的動態(tài)變化對各種生命過程有重要影響。例如在許多疾病的發(fā)生和發(fā)展進程中,常常伴隨著某些蛋白質(zhì)的表達異常。 定量蛋白質(zhì)組學就是把一個基因組表達的全部蛋白質(zhì)或一個復雜的混合體系中所有的蛋白質(zhì)進行精確的定量和鑒定。目前定量蛋白質(zhì)組學技術主要分為標記(Label)和非標記的(Label Free)定量策略,其中標記策略又分為體內(nèi)標記(如 SILAC、15^N 標記),以及體外標記(如 iTRAQ、TMT 標記)。

(資料來源:百泰派克)

技術詳情

MRM(Multiple Reaction Monitoring)是一種研究目標蛋白分子的靶向定量蛋白組學研究方法。MRM基于目標分子的信息,有針對性的選擇數(shù)據(jù)進行質(zhì)譜數(shù)據(jù)采集,對于符合目標離子規(guī)則的信號進行采集,去除不符合規(guī)則的離子信號的干擾。MRM質(zhì)譜分析經(jīng)過三個階段:
1、通過MS篩選出與目標分子特異性一致的母離子;
2、碰撞碎裂這些母離子,去除其他離子的干擾;
3、只對選定的特異MS/MS2離子進行質(zhì)譜信號的采集。MRM質(zhì)譜技術是高精準度的蛋白定量鑒定技術,是一次性精準定量研究復雜樣品中多個目標蛋白的絕佳方法。如果借助同位素標記的目標肽段作為內(nèi)參,可以實現(xiàn)蛋白絕對定量鑒定。

(資料來源:百泰派克)

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