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運用成熟的實時定量PCR技術(shù)準確、快速地定量檢測各種組織、原代細胞及細胞系中目的miRNA的表達情況。

MicroRNA(miRNA) 是一類長度約19-24nt的非編碼單鏈RNA，通過堿基互補配對的方式與靶基因的3′-UTR區(qū)部分或完全互補，剪切靶基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物或者抑制轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的翻譯，從而起到轉(zhuǎn)錄后調(diào)控靶基因表達的作用。miRNA廣泛存在于動物、植物、真菌及病毒的基因組中，調(diào)控生物體生長發(fā)育和疾病發(fā)生等過程中相關(guān)基因的表達。MiRNA的異常表達可能會導(dǎo)致生理狀態(tài)的異常和疾病的產(chǎn)生，在多種癌癥中，其表達水平會發(fā)生明顯改變，有可能起到原癌基因和抑癌基因的作用。此外，在許多其他的病變組織和細胞中也檢測到了miRNA的異常表達。因此對miRNA的表達的研究具有重要意義。

miRNA的結(jié)構(gòu)較為特殊，其長度只有19-24nt，不能夠?qū)ζ溆闷胀ㄒ镞M行逆轉(zhuǎn)錄，一般可采取兩種特殊的miRNA逆轉(zhuǎn)錄方法：莖環(huán)法和加polyA尾法。在成功逆轉(zhuǎn)錄后，根據(jù)序列特點直接設(shè)計相應(yīng)的通用引物和特異性TaqMan探針，即可對其進行熒光定量。除常規(guī)TaqMan探針以外，用戶還可選擇設(shè)計合成TaqMan-MGB探針，其探針設(shè)計得更短，特異性更高。

miRNA逆轉(zhuǎn)錄方法示意圖? A.莖環(huán)法B.加A法