特異位點(diǎn)甲基化檢測(cè)
（detection of methylation）
技術(shù)概述
DNA甲基化是最早發(fā)現(xiàn)的基因表觀(guān)修飾方式之一，真核生物中的甲基化僅發(fā)生于胞嘧啶，即在DNA甲基化轉(zhuǎn)移酶（DNMTs）的作用下使CpG二核苷酸5’-端的胞嘧啶轉(zhuǎn)變?yōu)?’-甲基胞嘧啶。DNA甲基化通常抑制基因表達(dá)，去甲基化則誘導(dǎo)了基因的重新活化和表達(dá)。這種DNA修飾方式在不改變基因序列前提下實(shí)現(xiàn)對(duì)基因表達(dá)的調(diào)控。脊椎動(dòng)物DNA的甲基化狀態(tài)與生長(zhǎng)發(fā)育調(diào)控密切相關(guān)，比如在腫瘤發(fā)生時(shí)，抑癌基因CpG島以外的CpG序列非甲基化程度增加，CpG島中的CpG則呈高度甲基化狀態(tài)，導(dǎo)致抑癌基因表達(dá)的下降。
技術(shù)詳情
技術(shù)名稱(chēng) | 技術(shù)原理 | 參考文獻(xiàn) |
Bisulfite sequencing，BSP | Bs結(jié)合測(cè)序 | Frommer et al. 1992 |
COBRA | Bs結(jié)合酶切 | Xiong et al. 1997 |
Methylation-specific PCR，MSP | Bs結(jié)合PCR | Herman et al. 1996 |
MethyLight | Bs結(jié)合定量PCR | Eads et al. 2000 |
HRM | Bs結(jié)合高分辨率溶解曲線(xiàn) | Wittwer et al. 2003 |
Pyrosequencing | Bs結(jié)合焦磷酸測(cè)序 | Colella et al. 2003 |
MSRE-PCR | 酶切結(jié)合PCR | Singer-Sam et al. 1990 |
MS-SnuPE | Bs結(jié)合單核苷酸延伸 | Gonzalgo and Jones 1997 |
MS-SSCA | Bs單鏈構(gòu)象分析 | Maekawa et al. 1992 |
MSO | Bs結(jié)合芯片分析 | Adorjan et al. 2002 |
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