關于mirRNA反轉錄的技術問題?
我現在正在嘗試通過Q-RT PCR的方法檢測mir433的表達,用試劑盒提取的mirRNA濃度普遍在100ng/ul左右。反轉錄的方案是在mirRNA上加10個左右的A,之后用3`oligoT的引物反轉錄。用的Takara的polyA聚合酶(2181),這個酶的體系怎么配,說明書上沒有說明。請大神指導,此外,有其他成功的反轉錄方案,但說無妨,萬分感謝!
我現在正在嘗試通過Q-RT PCR的方法檢測mir433的表達,用試劑盒提取的mirRNA濃度普遍在100ng/ul左右。反轉錄的方案是在mirRNA上加10個左右的A,之后用3`oligoT的引物反轉錄。用的Takara的polyA聚合酶(2181),這個酶的體系怎么配,說明書上沒有說明。請大神指導,此外,有其他成功的反轉錄方案,但說無妨,萬分感謝!
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